- 郭彩霞;王继超;高姝欣;余祥丽;苏苑;张国刚;
目的 基于网络药理学探讨铁皮石斛活性成分抗宫颈癌的潜在作用机制。方法 采用Genecards和OMIM数据库得到宫颈癌的作用靶点。查阅文献得到铁皮石斛的化学成分,通过SWISS ADME数据库筛选得到铁皮石斛的活性化合物并通过SWISS TartgetPrediction数据库得到相应的靶点基因。利用Cytoscape 3.7.2得到“药物-疾病-靶点”网络图,通过String数据库构建蛋白质相互作用网络,利用Metascape对潜在靶点进行GO富集分析以及KEGG通路分析。使用Sybyl-x 2.1软件进行分子对接,通过Discovery Studio Visualizer软件得到它的3D结合模型。结果 通过筛选得到铁皮石斛与宫颈癌相关的化合物25个,铁皮石斛抗宫颈癌靶点34个。获得PPI核心基因ESR1,PTGS2,EGFR,MMP9,ERBB2,HIF1A;GO富集分析涉及38条目,其中生物过程20个,细胞组成9个、分子功能9个;KEGG富集分析得到43条相关信号通路;分子对接评估了活性成分与核心靶点之间的结合稳定性。结论 铁皮石斛通过多种方式抑制宫颈癌,显示了中药多靶点多通路的特点。
2022年06期 v.39;No.317 666-676页 [查看摘要][在线阅读][下载 1760K] [下载次数:1230 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:2 ] - 马运锋;韩小飞;苏国磊;邓素玲;
目的 探讨白芍总苷(total glucosides of paeony TGP)对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖、凋亡和炎性因子的影响及分子机制。方法 分离培养FLS,实验分为对照(NC)组(不作任何处理)、不同浓度白芍总苷组(0.5、1.0、1.5 mg·mL~(-1)白芍总苷)、miR-NC组(转染miR-34a模拟物对照)、miR-34a组(转染miR-34a模拟物)、anti-miR-NC组(转染miR-34a抑制剂对照)、anti-miR-34a组(转染miR-34a抑制剂)、白芍总苷+anti-miR-NC组(1.5 mg·mL~(-1)白芍总苷+转染miR-34a抑制剂对照)、白芍总苷+anti-miR-34a组(1.5 mg·mL~(-1)白芍总苷+转染miR-34a抑制剂)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki67)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、磷酸化p65(p-p65)、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IкBα)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-34a表达水平。结果 与对照组相比,不同浓度白芍总苷组Ki67表达水平降低,Cleaved-caspase-3表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);白芍总苷组IL-6、TNF-α含量显著降低,miR-34a表达水平显著升高,p-p65、p-IкBα蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-34a抑制FLS增殖和炎性因子释放,诱导细胞凋亡;而抑制miR-34a表达作用相反。且抑制miR-34a表达逆转了白芍总苷对FLS细胞增殖、凋亡、炎症因子释放及核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。结论 白芍总苷可能通过上调miR-34a表达抑制NF-κB信号通路抑制类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和炎性因子释放,并诱导细胞凋亡。
2022年06期 v.39;No.317 677-683页 [查看摘要][在线阅读][下载 1580K] [下载次数:944 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:29 ] |[阅读次数:2 ] - 谢蓉;林丹;杨柳;李芳;
目的 探究姜油酮对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(not-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)大鼠的保护作用及其机制。方法 采用高脂饲料饲养构建NAFLD大鼠模型,SD大鼠分为对照组、模型组、姜油酮Ⅰ组和姜油酮Ⅱ组,姜油酮Ⅰ组和姜油酮Ⅱ组每日分别给予0.12 mg·kg~(-1)和0.24 mg·kg~(-1)姜油酮1次,对照组和模型组给予等量碳酸氢钠溶液。酶联免疫吸附法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平;HE染色观察肝脏组织病理变化;蛋白质免疫印记法检测肝脏组织中Toll样受体4(TLR4)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白水平;实时荧光定量PCR法检测肝脏组织中TLR4 mRNA和Nrf2 mRNA水平。结果 与模型组比较,姜油酮可以改善NAFLD大鼠肝脏损伤,降低ALT、AST及MDA水平(P<0.05),升高GSH、SOD水平(P<0.05),肝组织中TLR4及TLR4 mRNA较模型组降低(P<0.05),Nrf2及Nrf2 mRNA较模型组升高(P<0.05)。结论 姜油酮对NAFLD大鼠有一定保护作用,其机制可能与调节TLR4和Nrf2有关。
2022年06期 v.39;No.317 684-689页 [查看摘要][在线阅读][下载 1173K] [下载次数:228 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:2 ] - 程耿;周舰;张朝阳;万莉;张景宇;杨军;
目的 探讨不同浓度姜黄素对前列腺癌干细胞维持和糖代谢的作用。方法 采用MTT法检测姜黄素对人正常前列腺上皮细胞RWPE-1增殖活性的影响,选择毒性作用较小的安全浓度干预人前列腺癌细胞PC-3。将PC-3细胞分为5组:对照(Con)组、姜黄素低(0.1μmol·L~(-1) Cur)、中(10μmol·L~(-1) Cur)、高浓度(50μmol·L~(-1) Cur)组、多烯紫杉醇(10 nmol·L~(-1) Doc)组。显微镜观察各组肿瘤细胞成球水平;流式检测CD44~+CD133~+细胞比例;比色法检测细胞ATP、乳酸和葡萄糖含量;Western blot检测细胞己糖激酶1(hexokinase 1,HK1)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)、有机阳离子转运体4(organic cation transporter 4,OCT4)、Nanog蛋白表达水平。结果 与对照组比较,姜黄素干预组与多烯紫杉醇组肿瘤细胞成球能力及CD44~+ CD133~+细胞比例降低,细胞中葡萄糖、乳酸及ATP含量明显减少,细胞干性相关蛋白(SOX2、OCT4和Nanog)及糖代谢相关蛋白(HK1、HK2和GLUT1)表达均明显降低,且这些抑制作用呈现出一定的姜黄素浓度依赖性。结论 姜黄素可抑制前列腺癌细胞的成球能力、干细胞维持及糖代谢。
2022年06期 v.39;No.317 690-694+716页 [查看摘要][在线阅读][下载 1682K] [下载次数:328 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:2 ] - 郭文姗;窦豆;
目的 探讨舒芬太尼(sufentanil, SUF)对胶质瘤细胞恶性行为的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人胶质瘤细胞U251,实验分组:Con组、SUF-L组、SUF-M组、SUF-H组、阳性对照组;CCK-8法、划痕实验、Transwell实验与平板克隆形成实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及克隆形成;采用qRT-PCR法检测胶质瘤组织、癌旁组织与各组U251细胞中miR-3614-5p的表达量;miR-NC、miR-3614-5p mimics分别转染至U251细胞,anti-miR-NC、anti-miR-3614-5p分别转染至U251细胞后加入100μg·L~(-1)舒芬太尼处理细胞24 h,采用上述方法分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。结果 与Con组比较,SUF-L组、SUF-M组、SUF-H组细胞增殖抑制率和miR-3614-5p的表达量升高,细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少,划痕愈合率降低,且呈剂量依赖性;SUF-L组、SUF-M组、SUF-H组与阳性对照组各指标比较差异均有统计学意义(P<0.05);与癌旁组织比较,胶质瘤组织中miR-3614-5p的表达量降低;转染miR-3614-5p mimics后细胞增殖抑制率升高,细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少,划痕愈合率降低,而转染anti-miR-3614-5p可降低SUF对U251细胞生物学行为的作用。结论 舒芬太尼可通过促进miR-3614-5p表达而减弱胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。
2022年06期 v.39;No.317 695-702页 [查看摘要][在线阅读][下载 1918K] [下载次数:91 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:2 ] - 郭晓波;李岗;赵宇峰;赵波;
目的 研究长非编码RNA linc00641对前列腺癌细胞多西他赛(docetaxel, DTX)耐药的影响,并探究可能机制。方法 取对数期PC-3细胞,分别转染pc-DNA与pc-DNA-linc00641,设为对照组、实验组。取未处理细胞设为空白组。转染48 h后采用qRT-PCR法检测细胞linc00641表达量;MTT法检测DTX对细胞的半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR检测细胞miR-362-5p表达量;免疫印迹法检测细胞N-myc下游调节基因1(NDRG1)蛋白表达量。结果 与空白组、对照组比较,实验组linc00641表达量、不同浓度DTX对细胞的增殖抑制率、细胞凋亡率、NDRG1蛋白表达量升高(P<0.05),DTX对细胞的IC_(50)、miR-362-5p表达量降低(P<0.05)。结论 过表达linc00641可逆转前列腺癌细胞DTX耐药,可能与其靶向下调miR-362-5p进而上调NDRG1表达有关。
2022年06期 v.39;No.317 703-708页 [查看摘要][在线阅读][下载 1461K] [下载次数:167 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:2 ]